افزایش میزان بیان پروتئین متصل شونده به دافی در پلاسمودیوم ویواکس به عنوان پروتئین کاندید واکسن مرحله خونی مالاریا
Authors
Abstract:
Abstract Background: The cysteine rich region II of Plasmodium vivax Duffy Binding Protein (PvDBP-II) is essential during merozoite invasion into the human erythrocyte and because of this biological importance, PvDBP-II is a vaccine candidate and a target for protective immunity against vivax malaria. In the present study we improved the yield of this protein by using E. coli (M15/BL21) expression system, which is easier for handling than genetic engineering approaches. Methods: After cloning of PvDBP-II in pGEM T easy vector, sub-cloning was carried out in pET 28a, pQE30 and pET24d expression vectors. Then expression was performed on the 1mM IPTG-induced M15 (pREP) and BL21(DE3) strains of E. coli containing expression constructs in different expression conditions such as different culture medias and temperatures. Purification was performed by metal affinity chromatography using Ni-NTA agarose under denaturing conditions. Elutes were separated on SDS-PAGE and western blotting was carried out to detect rPvDBP-II. Yields of purified rPvDBP-II were estimated by measuring optical density at 280 nm. Results: Expression of rPvDBP-II was successfully performed using M15-pQE30 expression system at OD600 = 0/6, 1mM IPTG, in LB2 and 37oC. Size of the recombinant protein on SDS-PAGE was 47 KD (a.a 198-588) and the highest amount of expression was 4h after induction. Western blotting with anti-His antibodies and human P. vivax infected serum, confirmed expression of PvDBP-II. Expression of PvDBP using M15-pQE30 yielded about 1200 μg/ml. Conclusion: In the present investigation, production of expressed PvDBP-II in E. coli (M15/BL21) expression system, in comparison with other two expression system, was in sufficient amounts for further evaluation without using complicated and expensive methods, with least process of transformation. Such a recombinant protein is highly needed for development of a recombinant vaccine and sero-epidemiological study of P. vivax malaria. Keywords: Type Plasmodium vivax, Duffy Binding Protein, Expression, pQE30-E.coli Expression system.
similar resources
افزایش میزان بیان پروتئین متصل شونده به دافی در پلاسمودیوم ویواکس به عنوان پروتئین کاندید واکسن مرحله خونی مالاریا
چکیده سابقه و هدف: منطقه ii غنی از سیستئین پروتئین متصل شونده به دافی در پلاسمودیوم ویواکس (pvdbp-ii) نقشی اساسی در حمله مروزوئیت های انگل به اریتروسیت های انسان ایفا می نماید. به همین دلیل این پروتئین به عنوان پروتئین کاندید واکسن در بررسی پاسخ های ایمونولوژیکی مورد نظر محققین است. هدف از این مطالعه بیان پروتئین مذکور به میزان بالا با استفاده از سیستم بیانی پروکاریوتی است. روش بررسی: پس از کلو...
full textارزیابی پاسخ های آنتی بادی موش balb/c نسبت به دو فرم آللی پروتئین نوترکیب آنتیژن رأسی غشا-۱ پلاسمودیوم ویواکس به عنوان کاندید واکسن مالاریا
هدف: آنتی ژن رأسی غشا-۱ یکی از آنتی ژن های امید بخش کاندید مرحله خونی برای توسعه واکسن مالاریا علیه انگل پلاسمودیوم است. تنوع ژنتیکی در آنتی ژن های حفاظتی که پدیده ای معمول در یک انگل پیچیده مانند انگل پلاسمودیوم است، باعث ایجاد چالش در توسعه واکسنی مؤثر علیه مالاریا شده که این پدیده، توانایی انگل برای فرار از پاسخ های ایمنی را افزایش خواهد داد. از این رو توسعه واکسن مالاریا، نیازمند ارزیابی پا...
full textبررسی ارتباط میزان بیان ژن پروتئین متصل شونده به عنصر تنظیمی استرول با پروفایل لیپیدی
Background and purpose: Atherosclerosis is a form of arteriosclerosis that is one of the main causes of death in the world. In coronary artery disease, the vessels are stenosed due to lipid aggregation and inflammation. Epidemiologic studies have shown that in addition to demographic factors such as age and sex, blood pressure, smoking, obesity diabetes and genetics are also associa...
full textفراوانی و توزیع گونه های پلاسمودیوم ویواکس و پلاسمودیوم فالسیپارم و میزان پارازیتمی در مبتلایان به مالاریا
Background and Aim: Malaria is still one of the major health problems in comparison with any other parasitic disease in Iran with considerable economic and mortality consequences. Sistan-and-Baluchestan, Hormozgan and Kerman are the most affected provinces in the country approximately 96% of the cases are reported from these three provinces. The aim of this study was to determine the frequency,...
full textپروتئین شوک حرارتی؛ کاندید واکسن سرطان
Background: Tumor cells express antigens that can be recognized by immune system as foreign particles. Heat shock proteins (HSPs) are molecular chaperones that bind to tumor antigens and mediate their uptake into antigen presenting cells. Methods: This articles is a review article and its data has been collected and categorized from the articles in the field of cancer immunotherapy. All the ar...
full textMy Resources
Journal title
volume 36 issue 1
pages 35- 42
publication date 2012-06
By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.
No Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023